Veelvoorkomende problemen bij vloeistofchromatografie (2)

2026-06-29

Een spookpiek is een niet-reproduceerbare piek die in een chromatogram verschijnt, maar niet meer terugkomt wanneer de analyse onder identieke chromatografische omstandigheden wordt herhaald. Interferentie door spookpieken is in vloeistofchromatografie bijna onvermijdelijk. Het komt vaker voor tijdens gradiëntelutie met bufferzouten of zure additieven, waardoor de scheiding en kwantificering van micro- of sporenanalytes wordt verstoord. Zodra spookpieken in experimenten verschijnen, moeten analisten veel tijd en moeite besteden om ze te elimineren, wat dit tot een berucht lastig probleem maakt. Door de verbeterde gevoeligheid van UV-detectoren en de groeiende vraag naar sporenanalyse in de afgelopen jaren, heeft het probleem van spookpieken steeds meer aandacht gekregen.

01 Bronnen van spookpieken

De belangrijkste bronnen van spookpieken in vloeistofchromatografie worden hieronder opgesomd:

Variaties in gradiëntelutie. Dit type spookpiek treedt vaker op bij lage UV-detectiegolflengten en vertoont over het algemeen een stabiele retentietijd.
Luchtbellen in de instrumentslangen. Spookpieken veroorzaakt door luchtbellen hebben meestal inconsistente retentietijden.
Aantasting of verslechtering van de testmonsters.
Verontreiniging afkomstig van mobiele fasen, het instrumentsysteem (inclusief handmatige injectiespuiten), chromatografische kolommen of monsters.
Intrinsieke onzuiverheden in het monster, die onregelmatig kunnen voorkomen in verschillende monsterbatches.
Restanten van analyten die op de kolom zijn achtergebleven als gevolg van onvolledige elutie van de vorige injectie.
Artefacten die ontstaan tijdens de toevoer en menging van de mobiele fase; controleer de pompafdichtingen en de mengprestaties van de mobiele fase op defecten.

02 Probleemoplossingsmethoden voor spookpieken

Wanneer spookpieken worden waargenomen, voer dan eerst blanco injecties uit om de bron ervan te achterhalen:

Als er ook in het blanco chromatogram identieke spookpieken verschijnen, sluit dan stapsgewijs contaminatie van het instrumentsysteem, de chromatografische kolom of de reagentia uit.
Als er geen spookpieken aanwezig zijn in de blanco run, kan de oorzaak liggen in monsterdegradatie, monsterverontreiniging, inherente onzuiverheden in het monster, verschillen tussen batches of overdracht van de vorige injectie. Analyseer en los het probleem op aan de hand van de specifieke situatie.

03 Preventieve maatregelen tegen spookpieken

Bepaal de stabiliteit van de doelanalytes om te bevestigen of ze gevoelig zijn voor afbraak.
Identificeer moeilijk te elueren stoffen in monsters. Indien aanwezig, verhoog dan de elutiekracht van de mobiele fase aan het einde van elke analysecyclus om ze volledig weg te spoelen.
Reinig de chromatografiekolommen en de slangensystemen van de instrumenten regelmatig.
Onze zelfontwikkelde Ghost Trapping Column is een echte aanrader. Deze verwijdert effectief onzuiverheden afkomstig van mobiele fasen, leidingen en mengers. Raadpleeg het artikel voor meer informatie. Kolom voor het vangen van geesten – Een oplossing met één klik voor problemen met Ghost Peak.